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本文標題:"顯微鏡觀察酵母形狀檢片,在測定出芽率的同時測定染色率"

發布者:yiyi ------ 分類: 行業動態 ------ 人瀏覽過-----時間:2015-9-10 16:47:50

顯微鏡觀察酵母形狀檢片,在測定出芽率的同時測定染色率

 
染色率的測定
 
    活的細胞因新陳代謝不停地進行,所以細胞內氧化還原
值(rH)頗小,還原力強,對無毒染料能還原脫色;而死細胞
及代謝緩慢的老細胞,無此還原力。次甲基藍(美藍)無毒,
能被活細胞還原為無色,故用以區別細胞的死活,以染色率
表示之。
 
    用上述觀察酵母形態的檢片,在測定出芽率的同時測定
染色率。計算時一般取3~5個視野的平均數。
酒母醪常易為各種細菌所污染。細菌個體小,消光率
小,在顯微鏡下不易明顯觀察,且細菌種類繁多,在工廠生
產條件下,檢查和鑒別是一件相當復雜和困難的事。在生產
中可采用一般的染色方法粗略地加以檢定。
    (1)試劑
    ①齊氏石炭酸復紅染色液(試劑120)  
    ②香柏油   
    ③二甲苯    
    (2)測定步驟
    ①檢片的制備取浸泡于酒精中的干凈的載玻片一塊,
在酒精燈上燒去殘酒(不要用布或紙抹)后,涂試樣一小滴
于載玻片中央,在火焰上通過2~3次,使涂片上的菌體貼
牢于載片上,以免染色洗滌時脫落(通過火焰固定涂片時,
要注意掌握通過火焰的速度和溫度,過快不易固定,過慢則
因溫度過高,細胞易變形。蛋白質在70℃以上就能凝固,
固定于載片上)。
載片固定后,滴數滴齊氏石炭酸復紅染色液于涂片上,
稍加熱,靜置1分鐘。染色時間一到,即用自來水沖洗,將
涂片上的染色液洗去(注意!水要沖在涂面旁邊,不要對準
涂面沖),而后用吸水紙吸千,稍停片刻,即可鏡檢。
    ②鏡檢方法將載片置于顯微鏡下,用油鏡觀察。先
數酵母總數,再數同一視野內被復紅染色之桿菌等的細胞
數,鏡檢3-5個視野,計算雜菌率。
酵母細胞數的測定
    酵母細胞數是成熟酒母醪的一項主要控制指標,是衡量
酒母質量、控制工藝操作的重要根據。因此,必須熟練地掌
握酵母細胞數的測定方法,及時地滿足生產的需要。
所用儀器和試劑
    血球計測定酵母細胞數通常應用血球計。血球計
為一塊具有H形溝槽的厚玻片

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