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發布者:yiyi ------ 分類: 行業動態 ------ 人瀏覽過-----時間:2012-8-23 17:39:58

 原理:  在實驗室我們不難將已經增殖之光合細菌分離出來,之前所配制的Winogradsky管柱,經過約一個月的照光培養,管柱清晰可見不同顏色的菌斑,我們只要將管柱內的少許液體,或是括取黏附于管壁的菌斑,直接四區劃線于礦物鹽類平板培養基,或是先接種于礦物鹽類培養液中,之后再經數次的純化培養,即可得到純菌的光合細菌。不過在學生實驗室中,對于綠硫菌、紫硫菌之絕對厭氧菌,我們只能割愛,僅能分離可兼性厭氧之光合菌 - 紫色非硫菌,因此菌在厭氧的情況下,可行光合作用,也可以行化學自營生活,以一般的實驗設備即可分離。

                紫色非硫菌可在平板上形成紫紅色的單一菌落,極易與其他雜菌區別,其菌落大小不一,再經一次純化后,挑取單一菌落,經革蘭氏染色后,以顯微鏡觀察并將其描繪下來,與圖鑑對照,得知其屬名。
 
材料:約經一個月培養之Winogradsky管柱、礦物鹽類培養液、礦物鹽類平板、厭氧缸、厭氧包、照光設備、移植環、酒精燈
 
步驟:
 
1. 配制礦物鹽類培養液:MgSO4 7H2O 0.2克、K2HPO4 1.0克、NaCl 0.5克、FeSO4 7H2O 0.01克、CaCl2 0.02克、MnCl2 4H2O 0.002克、NaMoO4 2H2O 0.001克、水1升;另外,每100毫升培養液中添加有機物如下:NH4Cl 0.1克、yeast extract 0.05克、sodium malate(或是sodium succinate)0.5克。溶液最后酸堿值為7.0 – 7.5。
2. 將約經一個月照光培養之Winogradsky管柱移至實驗室內,以移植環沾取管柱內之培養液,四區劃線于礦物鹽類平板,將平板放入厭氧缸內,置入厭氧包,蓋好蓋子,將厭氧缸放置于室溫下照光,約一星期后即可見紫紅色菌落的產生。若平板上還有其他雜菌,則再一次四區劃線,以得到單一菌落的紫色非硫菌,將純化之菌落接種保存之。
3. 以吸管由管柱內取出少量液體(約0.5毫升),加入礦物鹽類培養液中,將培養液置于室溫下照光,約一星期后即可看見培養液呈紫紅色。重複步驟2的純化過程,可以增加得到純菌的機率。
4. 挑取單一菌落,經革蘭氏染色后,于顯微鏡下觀察

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