任何曾經作過細胞培養的人,都會遇到與污染有關的問題,污染的發源來自許多形式,它有可能是已感染的細胞,設備,藥劑,試管及由空氣傳播之細菌的結果,因為它可以在不利的環境下造成惡性循環,基于重要性,追蹤可能的污染源有兩個范圍,包含:一個是細胞培養實驗室的準備工作,另一個是細胞培養處理的技術步驟。受污染的有機體一般有:細菌(bacteria),霉菌(fungi),酵母菌(yeasts),病毒(viruses),及霉漿體(mycoplasma)。通常,細菌污染透過與人直接接觸而發生,而霉菌污染極不易避免,一旦它們已經污染實驗桌或培養箱,霉菌形如長馬蹄狀及似綿羊毛狀的生長是可以用肉眼看見,霉菌通常透過空氣傳播,酵母菌也屬于霉菌類。

 

而透過病毒來污染似乎較不常見,原因可追溯于病毒對于超過37?C溫度的極敏感度。另一方面, 經由霉漿體的細胞培養感染較常發生,它們持續較久及不易處理,然而,使用較先進的方法,可以易于辨識它們。霉漿體異于細菌,因為,霉漿體分子更小,在0.22um至0.20um之間,沒有細胞壁及單細胞生殖,因為霉漿體感染時不常產生劇烈影響,即使,它在各種狀況下,入侵至受感染的細胞的metabolism內,它可維持長時間不被發現。所以,霉漿體的感染源不易追蹤,因為,它會以新方式的  cell lines 引入實驗室,即使,這血清產品制造者保證免于受到霉漿體的感染,但是,事實上,污染之血清仍是較有可能的原因。胰蛋白也是感染源之一,因為胰蛋白是由豬的胰臟產生之酵素,但常用于細胞培養過程中,如:enzymic dissociation of cells,由動物源感染的物質是一種危害,尤其是霉漿體。霉漿體也來自實驗室人員的嘴巴及喉嚨地區。

 

 

感染的第二個基本風險在于過程中使用的器具,特別是培養箱。毫無疑問地,培養箱可以為感染的原始發生負起責任,因為,它經常從外界被引入。雖然如此,因為要有良好的細胞培養之緣故,所以,必須將有效的保護機制放入操作中。故當評估各種培養箱系統時,以下所有保護機制應該列入考慮,如清除培養箱內的滋生物方式中,最可靠有效的為:至少維持溫度180?C的加熱滅菌及經常能夠把此當作必要條件。

 

 

在細胞成長中很重要的，是藉由箱內的大量濕度容量，在二氧化碳培養箱維持等滲壓的滲透壓比例。在過程中，需確保對抗污染的防御力。在此方面特別重要的是乾爽的內墻、簡單的清潔及可靠的滅菌。現已采用的有兩道程續：箱內無控制的水箱系統或昂貴、可控制的外部潮濕系統。就兩道手續而言，各有其利處；故WTB Binder有利地將其結合成一全新開發的系統。此新專利的Permadry系統是一具備可控制濕度釋放(可高達98%相對濕度)的可拆裝雙重水箱系統。此系統很可靠地可除去所有污染危險。

 

 

      培養箱對外最常見的污染途徑包含：排氣風扇輪軸,來自外部濕度系統的

流入流出物,測量路徑埠,供氣設備;無疑地，在箱內的循環風扇將被視為所謂的細菌彈弓(slingshot)，如此一來，在箱內中會發現空氣傳播的細菌。更進一步來說，絕對沒有外部濕度系統流出流入的聯結。因為在此便會產生最大的污染危險：由于溫度的不同，入口及出口處易產生凝結。而值得一提的是WTB Binder 二氧化碳培養箱的密閉系統，因唯一外部聯結即氣體入口，還是受fine filter的保護。此外，此密封系統亦有如下優異處：極小的系統聯結，卻有著極大的穩定度和極小的故障率。對使用者來說是非常有親和性的。此一體成型(又稱bath tub)，完全無縫之內槽有著類似盆狀圓弧邊緣；這是為何不可能會醞釀細菌的溫床，且無障礙的落實完整的清潔及消毒。

 

 

   其他方式包括人為的內部消毒,此方法僅在可觸碰到的地帶才有效果, WTB Binder在培養機制上呈現一種非常進步的設計,采用bathtub原則,整個內部能夠簡單地清理及清潔后,不會留下剩馀物,因為,整個器具,包括基座,可以有彈性地移動。另一方面,有hot-air滅菌的裝置,所以,內部元件都不需更動,另一個在cell lines最大感染是由空氣傳播污染的方式,故將不要的濃縮物留在里面,造成細胞感染。