本文標(biāo)題："原菌均勻涂布在一個(gè)瓊脂平板上-紙片擴(kuò)散技術(shù)"
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原菌均勻涂布在一個(gè)瓊脂平板上-紙片擴(kuò)散技術(shù)
紙片擴(kuò)散法
在紙片擴(kuò)散法(disk diffusion method或Kirby—Bau—er met
hod)中，將標(biāo)準(zhǔn)數(shù)量的某種病原菌均勻涂布在一個(gè)瓊脂平板上，然
后將數(shù)片已浸潤特定濃度的化學(xué)治療藥物的濾紙圓片鋪在瓊脂表面
；最后將這種鋪有抗生素紙片的培養(yǎng)皿進(jìn)行培養(yǎng)。在培養(yǎng)中，每種
化學(xué)治療藥物會(huì)從紙片朝各個(gè)方向擴(kuò)散。低分子量的藥物比高分子
量的擴(kuò)散得快。在紙片周圍，由于藥物抑制微生物的生長，會(huì)出現(xiàn)
透明的區(qū)域，稱為抑菌圈(zones of inhibition)。抑菌圈的大小
并不能定量表示藥物的抑制程度，因?yàn)楦鞣N化學(xué)治療藥物的擴(kuò)散速
度有所不同。例如，某些大分子量藥物只能擴(kuò)散很短的距離，形成
很小的抑菌圈，但它卻可能有很強(qiáng)的抑菌能力。在特定培養(yǎng)基中，
微生物數(shù)量和藥物濃度又是一定的情況下，可以建立抑菌圈直徑的
標(biāo)準(zhǔn)方法，經(jīng)校正可用直徑的大小反映微生物對(duì)藥物是敏感、中等
敏感、還是有抗性。
即使可以合理解釋紙片擴(kuò)散法中的抑制現(xiàn)象，但也有可能是抑
制能力最強(qiáng)的化學(xué)治療藥物并不能夠治愈感染。有些化學(xué)治療藥物
雖然對(duì)病原菌有很強(qiáng)的抑制能力，卻不能在一定程度上殺死病原菌
并控制感染。此時(shí)就需要用殺菌劑來清除病原菌。但紙片擴(kuò)散法卻
無法保證鑒別殺菌劑。另外，我們?cè)隗w內(nèi)(活的生物體內(nèi))用藥得到
的結(jié)果往往與體外(在實(shí)驗(yàn)室器皿中)實(shí)驗(yàn)獲得的結(jié)果不同。生物體
內(nèi)的代謝過程可能會(huì)抑制抗微生物藥物的活性甚至使其失活。
E實(shí)驗(yàn)(E—test)是對(duì)紙片擴(kuò)散法的一種改進(jìn)，該方法使用含濃
度梯度的抗生素的塑料條帶。在條帶上打印濃度值，這樣便于實(shí)驗(yàn)
室的技術(shù)人員直接讀出抑制細(xì)菌生長所需的最低濃度。
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