本文標題："熒光顯微鏡技術定位熒光動物細胞-圖像顯微鏡"
發布者：yiyi ------ 分類: 行業動態 ------
人瀏覽過-----時間：2017-3-20 0:38:4
熒光顯微鏡技術定位熒光動物細胞-圖像顯微鏡
為很多哺乳動物表達質粒中所用的強啟動子能引起熒光蛋白過表達
的級聯放大效應，并且熒光蛋白的桶狀結構可以使其較弱[如水母(
Aequorea victoria)突變體]或者較強[如某些珊瑚和異輻海葵(Dis
co一50ma and Heteractis crispa)突變體]地自我交聯。6．開始
實驗時，應考慮到整個研究的時間進程。如果實驗進程很快，成像
的間隔時間應該很小或為零。在這種情況下，影像掃描和影像收集
也要迅速。由于信噪比會隨所收集的光子數目的平方根增加(即掃
描時間越長，信噪比越好)，增加幀頻通常可降低信噪比。由于進
程較慢的研究掃描時間更長，并且有更長的時間間隔，因此可以減
少這些限制。兩種情況均應考慮整個激發時間以減少光漂白效應。
7．使用傳統的熒光顯微鏡技術定位目的熒光細胞后，首先調節焦
距、激發水平和探測器的捕獲能力，在較短的時間內掃描細胞，探
測器可以從感興趣的焦平面獲取足夠的信號。要盡可能快地完成這
些步驟，以減輕甚至在實驗開始前就開始的光漂白效應。如果最早
一次的成像可行，那么在以后所有的GFP時延性實驗中，采用已經
摸索出的設備參數，如掃描時間，激發水平和檢波器的捕獲和篩檢
，保持成像的一致性，或至少可以作為一個良好的起點。8．設置
圖像理想的像素大小。許多設備有可選擇的范圍(64像素×64像素
～2048像素×2048像素)。通常，每平方微米的像素越多，影像就
越清晰；然而，這些高像素的影像在同樣的像素設置時間中需要更
長時問的掃描，并且需要更多的儲存空間。記住為了使數碼影像保
持空問分辨率，應該調整像素的大小到每個可分解單元≥2個像素
。可分解單元(r)取決于物鏡的光圈(NA)和激發光的波長Q)(r—o．
61 xz／NA)。9．為每個影像設置理想的掃描時間。像前面提到的
，研究進程的相對速度在一定程度上決定掃描時間。通過改變像素
設置時間(每個像素收集熒光的時間)改變總的掃描時間或者平均一
個像素所需要的時間(多次影像掃描后，單個像素收集的總熒光除
以掃描次數)。簡單地說，改變掃描時間在本例中不會引起差別。
然而，如果使用平均像素，則應考慮到與畫面平均(重復掃描整張
影像)相對的線平均(用平均的像素重復掃描單一的像素線，進行平
均)與平均畫面。在活細胞中，熒光標記的蛋白質可能正在細胞中
運動，而且平均畫面像素經過掃描一整張影像所需要的時間在不同
的時間點被收集。這樣將會使熒光信號在比平常更大的范圍內丟失
。然而，線平均或者改變像素設置時間，以及考慮改變掃描時間和
進展速度可以降低或者消除
這種丟失效應。
后一篇文章：蚜蟲細胞質中含有蚜蟲巴克納氏菌-細菌顯微鏡 »
前一篇文章：« 小球藻廣泛分布于淡水、海水和土壤中分析顯微鏡
tags:材料學,技術,光學,微生物,金相顯微鏡,上海精密儀器,
熒光顯微鏡技術定位熒光動物細胞-圖像顯微鏡,金相顯微鏡現貨供應
本頁地址：/gxnews/4089.html轉載注明
本站地址：/
http://www.xianweijing.org/